| 隨著疫情的常態(tài)化，大家越來越熟悉新冠核酸檢測,。新冠核酸快速檢測是新冠病毒檢測“金標準”,，可是對于檢驗人來說,，這個金標準可不簡單，眾所周知PCR檢測技術(shù)本來就屬于高技術(shù)檢測,。再加上新冠核酸檢測的特殊性,，對標本的檢測帶來巨大困難，隨之而來的就是各種假陽性,、假陰性的結(jié)果,。那么如何解決這些問題就成為檢驗人的一個難題。其實如果我們對PCR檢測了解多一些,，其實這些問題是可以避免的,。
一 假陰性結(jié)果原因：
l 試劑質(zhì)量：試劑比對、性能驗證,、批間差等
檢測試劑：靈敏度
提取試劑：提取效率
l 標本因素
標本類型：肺泡灌洗液,、痰液、鼻拭子、咽拭子,、肛拭子等
標本采集：采樣不規(guī)范,、部位不當(dāng)、采集標本中被感染的細胞太少或沒有,。
標本保存,、運輸與處理：室溫放置不超過4小時，應(yīng)在2-4小時內(nèi)送到實驗室,。長途運輸應(yīng)采用干冰等制冷方式保存,。24小時未檢測的樣本應(yīng)置于-70℃保存，新冠病毒RNA病毒靶基因降解對于RNA樣品影響更加嚴重,。
l 人員操作：采樣、核酸提取,、結(jié)果解讀,、問題分析糾正以及質(zhì)量控制等。
二 如何避免假陰性措施
1： 要保證試劑的質(zhì)量,，必須建立試劑驗證嚴格的SOP文件,，每一批次的試劑比對、性能驗證必須認真完成并形成書面報告已備溯源,。
2: 重癥以及危重癥患者應(yīng)該首選肺泡灌洗液以及痰液,。普通篩查最好選用鼻拭子。
3: 操作人員一定選用技術(shù)能力合格,，身體健康,，心理素質(zhì)較好的工作人員。
4: 核酸提取應(yīng)該嚴格執(zhí)行sop,，符合試劑說明書要求,，Sop建立必須科學(xué)具有操作性。
5：科學(xué)規(guī)范采樣,。
6：規(guī)范送檢,，合理時間檢測可以有效預(yù)防假陰性。
7：PCR抑制物是造成假陰性的重要原因,，所以實驗室盡量不存放與實驗無關(guān)物品,，安全柜應(yīng)該無多余物品。吸頭選用去RNA酶的產(chǎn)品,。
三 假陽性結(jié)果原因：
l 陽性質(zhì)控品交叉污染
l 強陽性標本交叉污染
l 擴增產(chǎn)物污染
四 如何避免假陽性措施
1：如果2份假陽性樣本均在陽性質(zhì)控管附近,，可以推測是加樣操作不當(dāng)引起。
2：某一批檢測結(jié)果出現(xiàn)多個陽性結(jié)果,，而且復(fù)檢仍為陽性,，但是在其它機構(gòu)檢測為陰性。這種結(jié)果多為樣本中有一個強陽性，因為操作人員操作不當(dāng)導(dǎo)致后續(xù)樣本全為陽性,，因為是原始樣本污染,，所以復(fù)檢也為陽性。
3：實驗人員在常規(guī)篩查中發(fā)現(xiàn)單靶標陽性,，工作環(huán)境檢測也能檢測到,，該情況多為擴增產(chǎn)物污染，該情況出現(xiàn)多為工作人員無分區(qū)概念,，擴增區(qū)沒有嚴格進行消毒造成高濃度擴增產(chǎn)物被帶入到提取實驗區(qū),，引起的假陽性。
上述情況均可以通過分區(qū)操作,、嚴格實驗室清潔消毒,、加強操作人員的操作規(guī)范性避免。
4：嚴格執(zhí)行三份陰性樣本隨機放在臨床樣本中參與整個提取擴增過程的質(zhì)控策略,。
5：擴增八連管的蓋子一定要蓋嚴以防泄露,。
引起假陽性和假陰性的原因有很多，作為檢驗人應(yīng)該嚴格執(zhí)行SOP,，提高實驗人員的檢驗技能,，把每個環(huán)節(jié)都落到實處，真正做到“做你所寫,，寫你所做”,，那么我們的檢驗報告將非常科學(xué)公正,。同時在全面抗擊疫情中展現(xiàn)出檢驗工作人員科學(xué),、專業(yè)、敬業(yè)的精神面貌,。
參考文獻：醫(yī)療機構(gòu)新型冠狀病毒核酸檢測工作手冊（試行 第二版）
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